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關于化學發光磁珠的免疫分選你一定要了解這些知識

發布時間:2021-08-26      點擊次數:214

    化學發光磁珠將固化試劑特有的優點與免疫學反應的高度特異性結合于一體,以免疫學為基礎,滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化以及分子遺傳學等各個領域,其在免疫檢測、細胞分離、生物大分子純化和分子生物學等方面得到了越來越廣泛的應用。

    化學發光磁珠的分選:

    免疫磁珠細胞分選方法可以在幾分鐘內從復雜的細胞混合物中分離出很高純度的細胞。把細胞用超級順磁性的MACSMicroBeads(MACS微型磁珠)特異性地標記,磁性標記完后,把這些細胞通過一個放在強而穩定磁場中的分選柱。分選柱里的基質造成一個高梯度磁場。被磁性標記的細胞滯留在柱里而未被標記的細胞則流出。當分選柱移出磁場后,滯留柱內的磁性標記細胞就可以被洗脫出來,這樣就完全可以獲得標記和未標記的兩個細胞組份。

    超順磁性的MACSMicroBeads的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細胞的一百萬份之一,可與病毒的大小相比。標記細胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標記物間的反應可在幾分鐘內完成。

    由于微型磁珠的體積極小,所以不會對細胞造成機械性壓力,而且使孵育時間短,操作過程快。MicroBeads形成一個穩定的膠體液,它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會激活細胞或影響細胞的功能和活力,細胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除,因此,陽性分選出的細胞(即磁性標記細胞)可立即用于分析和隨后的實驗。

    用MACS細胞分選系統可以分離出非常純的細胞群體,而且有的回收率和存活率。依據細胞頻率和標記表達水平的不同,MACS分離細胞的純度可達95%-99.9%,回收率>90%。
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